PTEN/PI3K/Akt信号通路在血管外膜CD34+干细胞参与血管新内膜形成中的作用
张佳
沈艳
昆明医科大学第一临床医学院,云南 昆明 650500
摘要：目的:探讨PTEN/PI3K/Akt信号通路在血管壁干细胞(VRSCs)参与血管损伤后新内膜形成中的作用.方法:①从42 只健康SD大鼠中随机选取18 只制备颈动脉内皮损伤动物模型,分别于0、7、28 d时随机取6 只大鼠,各取损伤部位的左颈总动脉1cm左右,制备血管组织冰冻切片,观察动脉内膜厚度的变化;行组织免疫荧光染色,计算PTEN、p-PI3K及p-Akt阳性细胞占CD34+细胞的比例,观察损伤后PTEN/PI3K/Akt信号通路在CD34+VRSCs中的激活情况.②另取 18 只大鼠随机分为假手术组、赋形剂组和抑制剂组3 组,每组6 只.假手术组只分离血管,赋形剂组和抑制剂组均制备颈动脉内皮损伤模型,然后通过血管外膜分别给予磷酸盐缓冲液(赋形剂组)和PI3K/Akt通路阻断剂LY294002(抑制剂组),测定各组损伤血管组织新内膜面积、中膜面积及其比值.③余6 只大鼠随机分为对照组和小干扰RNA(siRNA)-PTEN组,每组 3 只,均取颈总动脉外膜,通过免疫磁珠分选法筛选并纯化CD34+VRSCs,siRNA-PTEN组的CD34+VRSCs体外培养后转染PTEN siRNA;两组CD34+VRSCs均应用定量聚合酶链反应及Western blot方法检测PTEN/PI3K/Akt基因及其蛋白表达水平.结果:血管新内膜随损伤后时间的延长而逐渐增厚.在损伤修复早期(损伤后7 d),CD34+VRSCs p-PI3K、p-Akt表达比例明显升高,PTEN的表达比例未见明显升高;在损伤修复晚期(损伤后28 d)后,CD34+VRSCs细胞中的PTEN表达量明显升高,p-PI3K、p-Akt表达量下降.在血管内皮损伤术后,通过外膜给药阻断PI3K/Akt通路,新生血管内膜面积和内膜/中膜面积比均较赋形剂组下降.体外分离纯化后的模型大鼠CD34+VRSCs经转染PTEN siRNA后,PTEN基因和蛋白表达下调,PI3K/Akt基因和蛋白表达水平上调.结论:PTEN/PI3K/Akt信号通路在血管外膜CD34+干细胞参与血管损伤后新生内膜的形成中发挥着重要作用.
关键词：血管内膜再狭窄血管壁干细胞PTENPI3KAkt
分类号：R654.3(外科学各论)
资助基金：昆明医科大学大学生创新性实验项目(2021JXD07)
论文发表日期：2023-03-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 7-12,后插1 )
英文信息