蛋白酶活化受体1在热打击人脐静脉内皮细胞炎症激活中作用的研究
王郑莲1
徐秋林2
邓茂林3
刘亚楠4
苏磊5
1.长沙市中医医院本部急诊科,湖南 长沙 410100;南方医科大学生命科学楼病理生理实验室,广东 广州 5105152.广东省人民医院重症医学科,广东 广州 5100003.长沙市中医医院本部急诊科,湖南 长沙 4101004.南方医科大学南方医院重症医学科,广东 广州 5233265.南部战区总医院重症医学科,广东 广州 510010
摘要：目的:观察热打击对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中蛋白酶活化受体1(PAR1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA及蛋白表达水平的影响,探讨PAR1 在热打击后HUVECs炎症激活中的作用.方法:培养的HUVECs分为37℃对照组(37℃培养)和42℃热打击组(42℃培养2h后再于37℃继续培养至观察时间点).42℃热打击细胞再分别预先采用PAR1 抑制剂SCH79797(42℃+SCH组)、激活剂TFLLR-NH2(42℃+TFL组)、PAR1 siRNA转染(42℃+PAR1siRNA组)、腺病毒转染(42℃+AdPAR1)等预处理,再行热打击.各组细胞 PAR1、TNF-α、IL-6、ICAM-1 的mRNA表达水平采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测,PAR1 蛋白水平采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测,TNF-α、IL-6、ICAM-1 的蛋白表达水平采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测.将人单核细胞THP1 与各组HUVECs共同培养,倒置荧光显微镜下观察单核细胞对 HUVECs 的黏附情况.结果:与 37℃对照组比较,42℃热打击组PAR1、TNF-α、IL-6、ICAM-1 的mRNA及蛋白表达水平在热打击结束后显著增高(P＜0.05 或P＜0.01);siRNA转染能有效降低而腺病毒转染能有效升高常温培养及热打击后HUVECs的PAR1 蛋白表达(P＜0.01).与单纯热打击HUVECs比较,SCH预处理及PAR1siRNA转染能有效降低HUVECs热打击后TNF-α、IL-6、ICAM-1 的mRNA及蛋白水平,并能有效减轻单核细胞对HUVECs热打击后的黏附作用;TFL、AdPAR1 能有效增加HUVECs热打击后TNF-α、IL-6、ICAM-1 的mRNA及蛋白表达水平,并能有效增强单核细胞对HUVECs热打击后的黏附(P＜0.05,P＜0.01).结论:热打击可导致HUVECs的PAR1 活化,PAR1 参与了热打击HUVECs炎症激活的过程.
关键词：热打击人脐静脉内皮细胞蛋白酶活化受体1炎症反应单核细胞
分类号：R594.1+2(全身性疾病)R34(基础医学)
资助基金：广东省自然科学基金博士启动项目(S2013040015661)中国博士后科学基金(2014M552180)
论文发表日期：2023-09-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 173-179,封2,封3 )
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