BMX对脂多糖刺激巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α和吞噬功能的影响
胡迎1
韩李念2
邱乐2
王飞2
陈旭林2
1.安徽医科大学第一附属医院烧伤科,安徽 合肥 230022;宜昌市中心人民医院烧伤整形外科,湖北 宜昌 4430002.安徽医科大学第一附属医院烧伤科,安徽 合肥 230022
摘要：目的:探讨非受体酪氨酸激酶——X染色体骨髓酪氨酸激酶(BMX)对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞分泌促炎性细胞因子——肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和脂多糖刺激巨噬细胞对大肠埃希菌吞噬功能的影响.方法:以巨噬细胞系RAW264.7 细胞为实验对象,进行以下实验.①BMX对巨噬细胞分泌TNF-α的影响及其信号通路:实验分空白对照组、LPS组、25 μmol/L BMX-IN-1+LPS组、75 μmol/L BMX-IN-1+LPS组.LPS组用 10 ng/mL LPS刺激 1 h.25 μmol/L BMX-IN-1+LPS组和75 μmol/L BMX-IN-1+LPS组预先用相应浓度的BMX抑制剂BMX-IN-1处理12 h,再用10 ng/mL LPS刺激1 h,流式细胞术检测巨噬细胞的TNF-α分泌量,蛋白质印迹法检测BMX、磷酸化c-Jun 氨基端激酶(p-JNK)蛋白的表达.②BMX在炎症环境下对巨噬细胞吞噬能力的影响:带绿色荧光的大肠埃希菌(E.coli)摇菌过夜,分光光度计测吸光度值.实验分空白对照组、LPS组、BMX-IN-1+LPS组.BMX-IN-1+LPS组预先用75 μmol/L BMX-IN-1处理12 h,LPS组和BMX-IN-1+LPS组用 10 ng/mL LPS刺激,同时,3 组按照RAW264.7 细胞∶E.coli=1∶50 的比例加入等量的大肠埃希菌.作用 2 h后,流式细胞术检测巨噬细胞吞噬率.结果:①空白对照组、LPS组和不同浓度BMX-IN-1+LPS组TNF-α分泌量的差异有统计学意义(F=151.1,P＜0.05),其中以LPS组的TNF-α分泌量[(78.68±3.67)%]最高,BMX-IN-1干预后TNF-α分泌量下降,以75 μmol/L BMX-IN-1+LPS组下降最明显(P＜0.05).②蛋白质印迹法测定结果显示,LPS刺激后,细胞内BMX和p-JNK表达明显增强,预先加入BMX-IN-1可以抑制这种表达的升高,各组间BMX和 p-JNK 表达比较,差异有统计学意义(BMX:F=319.2,P＜0.05;p-JNK:F=1 897.0,P＜0.05).③流式细胞术检测巨噬细胞对大肠埃希菌吞噬率的结果显示:PBS组、LPS组和BMX-IN-1+LPS组比较,差异无统计学意义(F=0.46,P＞0.05).结论:非受体酪氨酸激酶BMX通过c-Jun氨基端激酶途径促进LPS刺激巨噬细胞分泌TNF-α,但BMX对LPS刺激巨噬细胞的吞噬功能没有影响.
关键词：X染色体骨髓酪氨酸激酶巨噬细胞非受体酪氨酸激酶c-Jun氨基端激酶信号通路肿瘤坏死因子-α
分类号：R631.2(外科感染)
资助基金：国家自然科学基金(81372050)国家自然科学基金(81671877)
论文发表日期：2025-06-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 156-159 )
英文信息