eNOS信号通路介导雌激素对胰岛移植保护作用的实验研究
上官兆水1
王继华2
代丹丹1
刘素嬛1
1.厦门大学附属第一医院转化医学研究中心,福建 厦门 3610032.厦门大学附属第一医院转化医学研究中心,福建 厦门 361003;枣庄职业学院,山东 枣庄 277100
摘要：目的:探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路是否介导雌激素(E2)对胰岛移植的保护作用.方法:①E2应用时间和剂量优化:将雄性C57BL/6 小鼠随机分为 4 组:正常对照组(n=12)、糖尿病模型组(n=12)、糖尿病模型+移植胰岛组(移植组,n=12)、糖尿病模型+移植胰岛+E2 治疗组(移植+E2 组,n=48).对移植+E2 组小鼠分别连续给予 1、3、7 和 14 d的E2 治疗(4 μg/d,皮下注射,每组 6 只)以确定最佳实验时间,另对移植+E2 组分别给予 0.2、2.0、4.0 和20.0 μg/d的E2 治疗(连续 14 d,皮下注射,每组 6 只)以确定最佳实验剂量;②eNOS抑制剂干预实验:雄性C57BL/6 小鼠随机分为 3 组,分别为移植组、移植+E2 组、移植+E2+eNOS抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐组(移植+E2+L-NAME组),每组 4 只.移植+E2 组在颈部皮下植入E2 缓释片(每片 0.18 mg),移植+E2+L-NAME组在植入E2 缓释片的同时,每日腹腔注射L-NAME抑制剂 50 mg/kg,持续 14 d后收集样本.实验期间,对小鼠血糖水平进行监测,检测葡萄糖耐量,并通过酶联免疫吸附试验测定血浆胰岛素含量.采用免疫荧光染色技术分析移植物中eNOS阳性面积、胰岛β细胞阳性面积、血小板内皮细胞黏附分子(CD31)阳性面积.结果:E2 应用时间和剂量优化实验表明,与移植组血糖水平曲线下面积[(553.50±37.38)d·mmol/L]相比,E2 作用 14 d后,小鼠血糖水平曲线下面积[(383.40±47.78)d·mmol/L]显著降低(t=2.848,P＜0.05),其中注射 4.0 μg/d剂量效果最佳;利用 4.0 μg/d剂量E2 作用 14 d,与移植组相比,移植+E2组血糖水平明显降低(t=3.112,P＜0.05),血浆胰岛素含量及移植物胰岛β细胞面积显著增加(t值分别为 2.209、2.442,P＜0.05),移植物中血管密度和eNOS阳性面积亦有上升趋势,但差异无统计学意义(t值分别为2.131、2.205,P＞0.05).L-NAME抑制剂干预结果显示,与移植+E2 组相比,L-NAME干预后葡萄糖耐量显著上升(t值为 5.871,P＜0.05),移植物胰岛β细胞阳性面积显著降低[移植+E2 组为(54.09±2.16)%,移植+E2+L-NAME组为(38.59±3.75)%,t=2.674,P＜0.05],血浆胰岛素含量及血管密度呈下降趋势,但差异无统计学意义(t值分别为 1.950、1.606,P＞0.05).结论:E2 短期治疗能够有效保护移植胰岛的存活和功能,并促进血管重建,其机制可能与eNOS信号通路相关.
关键词：1型糖尿病雌激素胰岛移植内皮型一氧化氮合酶血管重建
分类号：R363(病理学)
资助基金：福建省自然科学基金资助项目(2021J011362)
论文发表日期：2025-08-28
在线出版日期：2025-09-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 246-252 )
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