刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化
文晓鹏1
邓秀新2
1.华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,湖北,武汉,430070;贵州大学农学院,贵州,贵阳,5500252.华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,湖北,武汉,430070
摘要：以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验.结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL 10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2 mmol/L dNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2 U Taq DNA多聚酶.经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用"Touchdown"扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对浓度(1.0μmol/L),模板DNA(4.0 mg/L)和Taq DNA多聚酶(3.0 U/管)的使用量,建立起适合于刺梨特异DNA片段检测及回收的特异PCR扩增实验体系,为刺梨的分子克隆奠定了技术基础.
关键词：刺梨近缘种PCR扩增实验体系
分类号：S685.120.1(观赏园艺（花卉和观赏树林）)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 35-39 )
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