超声波辅助农杆菌介导八棱海棠转rolC基因
丛郁1
王三红1
王红霞1
姚泉洪2
章镇1
1.南京农业大学园艺学院,南京,2100952.上海市农业遗传重点实验室,上海市农业科学院生物技术研究中心,上海,201106
摘要：应用超声波辅助农杆菌介导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,以期提高转化效率并获得转基因植株.利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理时期和农杆菌悬浮液中乙酰丁香酮(As)浓度对rolC基因转化率的影响.结果表明,叶盘在D600nm为0.6且含有75 mg/L As的农杆菌悬浮液中侵染2 min后,用功率为100 W的超声波处理30 s,再浸泡2.5 min,然后放到再生培养基上共培养3 d,能获得最佳的gus基因瞬间表达率.最佳处理条件下转化683枚八棱海棠叶片,共得到138个抗性愈伤组织和15株抗性苗,转化率为2.2%.GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有12个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因.
关键词：八棱海棠超声波辅助农杆菌转化rolC基因
分类号：S661.1(果树园艺)
资助基金：国家自然科学基金(30370987)江苏省应用基础研究项目(BJ200018)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 659-663 )
英文信息