板栗SSR和RAPD技术体系的建立
王同坤1
董超华2
马艳1
齐永顺1
张京政1
柏素花3
1.河北科技师范学院园艺园林系,河北,昌黎,0660042.河北科技师范学院生命科学系,河北,昌黎,0660043.莱阳农学院生命科学学院,山东,青岛,260019
摘要：主要从板栗DNA提取、PCR条件的优化等环节对SSR和RAPD的反应条件进行了优化.结果表明,采用PVP和β-巯基乙醇联合除酚,用多次洗涤和高盐相结合进行除糖提取高质量板栗基因组DNA,所获得的DNA完整,无降解,分子量在23 kb以上,可扩增、可酶切,D260nm/D230nm在2.0以上,D260n/D280m为1.8～2.0,产率为40～300 μgDNA/g叶组织,完全满足SSR、RAPD、AFLP等分子标记技术分析的需要.采用单因素对PCR反应体系中各个影响因素进行优化,结果表明对PCR结果影响最为明显的是退火温度和Mg2+浓度的变化.对退火温度和Mg2+浓度进行优化,确定RAPD的PCR反应体系Mg2+浓度为2.0 mmol/L MgCl2,退火温度38℃;SSR反应体系Mg2+浓度为2.0 mmol/L,退火温度56℃.建立了一套完善的适用于板栗的SSR和RAPD分析的稳定技术体系.
关键词：板栗SSRRAPD
分类号：S664.2(果树园艺)
资助基金：河北省自然科学基金(C2004000404)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 825-829 )
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