草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立
刘敏1
滕文静2
董清华3
晁慧娟3
李凤岚4
邱德有2
1.北京农学院植物科学技术系,北京,102206;国家林业局林木培育重点实验室,北京,1000912.中国林业科学研究院林业研究所,北京,100091;国家林业局林木培育重点实验室,北京,1000913.北京农学院植物科学技术系,北京,1022064.中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094
摘要:将东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane 13α-hydroxylase,13OH)基因全长cDNA正向插入到pCAMBIA1304.构建其植物表达载体pCT130H;将水稻小RNA 169d(microRNA 169d,miRNA 169d)基因前体(precursor):全长DNA正向插入到pCAMB1A1305.1,构建其植物表达载体pCO169d.用电击法把它们导人根癌农杆菌GV3101,获得有关工程菌株.用1 mL无菌注射器分别将这2种工程农杆菌悬浮液注射到草莓(Fragaria×ananassa)授粉后1周、2周、3周的果实中,发现授粉后2周果实适宜注射,可用于瞬时表达.对授粉后2周的果实进行不同注射部位、根癌农杆菌不同活化时期和根癌农杆菌悬浮液不同注射量试验,以蒂部注射、根癌农杆菌活化12 h和0.5 mL悬浮液注射量的效果最好,与结构基因130H和调节基因miRNA 169d相融合的GUS基因都得到表达,瞬时表达成功.
关键词:草莓果实瞬时表达根癌农杆菌基因功能
分类号:S668.4(果树园艺)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2007AA10Z182)国家自然科学基金(30671698)中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(200701)北京市教委植物遗传育种改良与种质资源创新平台资助项目(5075201029)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 60-65,封4 )
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