锥栗自然居群ISSR—PCR分析技术的建立
刘国彬1
龚榜初2
罗正荣3
1.中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳,311400;华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉,4300702.中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳,3114003.华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉,430070
摘要：提取野生锥栗的基因组DNA作为ISSR-PCR模板,对反应体系中的模板用量、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq DNA聚合酶用量5个主要影响因素进行梯度试验,并对扩增程序中的退火温度与循环次数进行了探讨,初步确立了适合野生锥栗的ISSR-PCR分析技术体系,即25μL反应体系中,模板DNA40或50ng、Mg2+ 2.25mmol·L-1、dNTPs 0.2 mmol·L-1、引物0.2 μmol·L-1、Taq DNA聚合酶1.0 U;PCR扩增程序为:94℃预变性3 min;然后94℃变性45s,(Tm+2~4℃)退火45s,72℃延伸2 min,共32个循环;最后72℃充分延伸5 min;1.5%琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物.
关键词：锥栗自然居群ISSR
分类号：S664.2(果树园艺)
资助基金：农业科技成果转化资金项目(2007GB24320385)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 103-107 )
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