苹果SRAP-PCR反应体系的建立
司鹏1
戴洪义2
薛华柏1
张玉刚2
郭俊英1
曹尚银1
1.中国农业科学院郑州果树研究所,郑州,4500092.青岛农业大学园林园艺学院,青岛,266109
摘要:以苹果(Malus domestica Borkh.)品种Telamon及Telamon×Fuji的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取苹果叶片的DNA,利用正交设计L16(45)和直观分析以及方差分析相结合,探讨了Mg~(2+)、dNTPs、Primer、Taq聚合酶、模板DNA用量对苹果SRAP-PCR反应的影响.建立了总体积为10 μL的苹果SRAP-PCR反应体系, Mg~(2+)浓度为2.0 mol·L~(-1),dNTPs浓度为0.8 mmol·L~(-1),Primer浓度为0.2 mol·L~(-1),Taq DNA聚合酶含量为0.6 U,DNA含量为60 ng,并含1 μL 10×buffer (Mg~(2+) free).应用该反应体系,用不同的引物组合对48份苹果样品DNA进行SRAP-PCR扩增,结果显示反应体系具有较高的稳定性.
关键词:苹果SRAP-PCR正交分析
分类号:S661.1(果树园艺)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2006AA100108-4-12-2)国家自然科学基金(30671455)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 168-173 )
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