根癌农杆菌介导寒富苹果转化体系的建立
杨越
张志宏
刘月学
何平
周宇
代红艳
赵桂玲
1.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108662.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108663.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108664.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108665.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108666.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108667.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,110866
摘要：以寒富苹果组培苗叶片为外植体,利用植物表达载体上含潮霉素抗性基因的根癌农杆菌EHA105(pCAMBIA1301)和含卡那霉素抗性基因的根癌农杆菌EHA105(pCAMBIA2301)对影响寒富遗传转化效率的因素进行系统研究.结果表明,寒富叶片对潮霉素反应敏感,在附加潮霉素的培养基上寒富叶片褐化较为严重.潮霉素和卡那霉素适宜的筛选质量浓度分别为4 mg·L~(-1)和25 mg·L~(-1).农杆菌介导寒富苹果转化体系的建立以MS + TDZ 2.0 mg·L~(-1) + NAA 0.5 mg·L~(-1)培养基为叶片离体再生芽培养基.适宜的转化条件为:菌液浓度D _(600 nm)=0.5、叶片外植体在菌液浸泡8 min、共培养时间为3～4 d、推迟4 d进行筛选培养.抗性基因对转化效率具有明显的影响,EHA105(pCAMBIA2301)的平均抗性芽再生率(0.96%)比EHA105(pCAMBIA1301)的平均抗性芽再生率(0.58%)高出几乎50%,EHA105(pCAMBIA2301)的抗性芽再生率最高达1.87%.GUS组织化学染色和PCR鉴定结果表明本研究获得了寒富苹果转基因植株.
关键词：苹果寒富农杆菌抗性基因遗传转化
分类号：S661.1(果树园艺)
资助基金：辽宁省高等学校创新团队项目(2009T089)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 174-178,封3 )
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