苹果茎沟病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备
宋艳苏1
郑银英2
李丽娜1
王国平1
洪霓1
1.华中农业大学植物科学技术学院,湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室,武汉4300702.石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室,新疆石河子,832003
摘要：构建了来源于梨的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)分离物P-4-1-69和P-L2的原核表达载体pET-p-4-1-69和pET-P-L2,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1 mmol·L-1IPTG下诱导表达.SDS-PAGE和用商业化ASGV抗体对诱导表达产物进行Western Blot分析结果表明,2个分离物的外壳蛋白基因(cp基因)在大肠杆菌中成功地进行了高效表达,重组外壳蛋白的大小约为31 ku.分别用含分离物P-4-1-69和P-L2的重组外壳蛋白的胶条免疫大耳白兔,制备了抗ASGV重组外壳蛋白的抗血清.采用间接ELISA法用所制备的抗血清对回收的重组外壳蛋白进行检测,当抗分离物P-4-1-69和p-L2的重组外壳蛋白的抗血清分别稀释512 000倍和64000倍时,检测结果仍为阳性.Western Blot分析和组织免疫印迹检测(Tissue blotting immunoassay,TBIA)结果表明,纯化的抗体具有较强的特异性,可有效检测梨样品中的ASGV.
关键词：苹果茎沟病毒cp基因原核表达抗血清
分类号：S661.2(果树园艺)
资助基金：国家梨产业技术体系项目(nycytx-29-08)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息