龙眼亚硫酸盐氧化酶(DlSO)基因的克隆及表达分析
帅良1
李静1
韩冬梅2
吴振先3
1.华南农业大学园艺学院,广州5106422.广东省农业科学院果树研究所,广州5106403.华南农业大学园艺学院,广州510642;广东省果蔬保鲜重点实验室,广州510642
摘要：[目的]探讨龙眼果实亚硫酸盐氧化酶基因(DlSO)在硫残留生物降解中的作用.[方法]以龙眼总RNA为模板,采用RT-PCR结合RACE法获得龙眼亚硫酸盐氧化酶基因全长cDNA序列,命名为DlSO;运用荧光定量PCR对其表达量进行分析;使用Clontech In-Fusion技术构建原核表达载体,使其在Rosetta(DE3)大肠杆菌中表达.[结果]DlSO序列全长1413 bp,包含一个1182 bp的开放阅读框,一个长37 bp的5’非翻译区序列和194 bp的3’非翻译区,预测编码393个氨基酸;同源性和系统进化分析结果均表明DlSO与毛果杨SO亲缘关系最近;荧光定量结果表明,在龙眼不同组织中,DlSO基因都有表达,其中在叶片中表达量最高,其次是花、幼果、根和果肉,在茎和果皮组织中DlSO基因的表达量最低;成功构建pET-32a-DlSO原核表达载体,经IPTG诱导后在Rosetta(DE3)大肠杆菌中成功表达.[结论]克隆了龙眼亚硫酸盐氧化酶基因(DlSO),并且成功构建了pET-32a-DlSO原核表达载体,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达出融合蛋白,为下一步研究龙眼亚硫酸盐氧化酶的作用奠定了基础.
关键词：龙眼亚硫酸盐氧化酶基因克隆荧光定量PCR原核表达
分类号：S667.2(果树园艺)
资助基金：现代农业产业技术体系(CARS-33-14)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息