野生毛葡萄芪合成酶基因双向启动子活性分析
和静
李瑞民
王跃进
1.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点试验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点试验室,陕西杨凌7121002.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点试验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点试验室,陕西杨凌7121003.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点试验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点试验室,陕西杨凌712100
摘要：[目的]研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’(Vitis quinquangularis‘Danfeng-2’)芪合成酶(stilbene synthase)基因双向启动子的启动活性与差异.[方法]通过染色体步移技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因双向启动子,并与UidA基因(β-葡萄糖苷酶基因,GUS)融合,利用真空渗透法在葡萄叶片中瞬时表达,组织化学染色和GUS蛋白定量法分别检测白粉菌接种、温度处理、茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸处理对双向启动子活性的影响.以毛葡萄‘丹凤-2’和欧洲葡萄‘赤霞珠’不同成熟时期果实的cDNA为模板,通过荧光实时定量PCR的方法分析VqSTS12/VvSTS 31和VqSTS33/VvSTS32的表达情况.[结果]PvqDSTS12受到白粉菌、茉莉酸甲酯、高温和低温的诱导后,启动活性增强,对水杨酸和脱落酸处理不敏感;PvqDS TS33在茉莉酸甲酯处理下启动活性增强,在高温和低温的处理下启动活性降低,对水杨酸、脱落酸和白粉病处理不敏感.荧光实时定量PCR结果显示,在果实发育的6个时期中,‘丹凤-2’VqSTS12和VqSTS33的表达量均高于‘赤霞珠’VvSTS31和VvSTS32.4个基因的基本表达趋势为:浆果转色期之前持续增长,转色后期下降,浆果半熟期达到最高峰,浆果成熟期表达降低.其中毛葡萄‘丹凤-2’VqSTS12的表达量在转色后期并未降低且增加到上一时期的2.3倍;欧洲葡萄VvSTS32基因在成熟期表达量升高为前一时期的1.42倍.[结论]双向启动子活性的研究为利用植物天然双向启动子提供依据.
关键词：中国野生毛葡萄芪合成酶双向启动子GUS
分类号：S663.1(果树园艺)
资助基金：国家自然科学基金(No.31372039)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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