番木瓜诱导型基因CpPGIP2启动子的克隆与分析
申艳红
陈晓静
戴志林
1.福建农林大学园艺学院·园艺植物遗传育种研究所,福州3500022.福建农林大学园艺学院·园艺植物遗传育种研究所,福州3500023.福建农林大学园艺学院·园艺植物遗传育种研究所,福州350002
摘要：[目的]获得诱导型基因CpPGIP2启动子,并分析该启动子的功能.[方法]以番木瓜CpPGIP2基因cDNA序列(HQ660394)搜索番木瓜基因组DNA序列,获得一段约2 000 bp的5’端上游DNA序列(ABIM01005077),参照该序列设计PCR特异引物,以番木瓜叶片DNA为模板克隆该启动子,并进行生物信息学分析.将3个启动子片段替换pCAM-BIA1301载体中的CaMV 35S启动子,构建缺失启动子表达载体,以GUS瞬时表达检测缺失启动子表达活性.[结果]获得了CpPGIP2起始密码子上游长为1 981 bp的调控序列,经分析该序列含有真菌、脱落酸、赤霉素、光照等多种响应元件,为诱导型启动子.构建了1个启动子全长表达载体和2个5’端缺失启动子表达载体,分别命名为pD0-1981、pD1-1204和pD2-261.启动子在番木瓜果肉中的瞬时表达显示,长度为1 204 bp的启动子表达活性最强.并且,该启动子在根、茎、叶、果肉和愈伤组织中均有不同程度的表达,在近外果皮的果肉处和根部表达最明显.[结论]本研究获得了CpPGIP2启动子序列,确定了表达活性最强的启动子长度,初步分析了启动子的表达模式和顺式作用元件,为进一步深入研究CpPGIP2基因功能以及将该启动子应用于植物基因工程育种奠定了基础.
关键词：番木瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白启动子调控元件载体构建
分类号：S667.9(果树园艺)
资助基金：福建农林大学园艺学院青年学术骨干培养基金(FAFU2012YYPY05)福建省自然科学基金(2010J05048)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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