龙眼DlLac7的克隆及其表达调控分析
田奇琳
林玉玲
郑庆游
苏荣峰
赖钟雄
1.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500022.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500023.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500024.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500025.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,350002
摘要:[目的]探索漆酶(laccase)与龙眼生长发育及逆境胁迫响应之间的关系.[方法]根据龙眼胚性愈伤组织转录组数据库unigene序列,利用RT-PCR和RACE技术,以‘红核子’龙眼胚性愈伤组织的cDNA为模板,克隆laccase基因,并利用实时荧光定量PCR技术对其在龙眼体胚发生过程中、不同组织部位和逆境胁迫响应中的表达进行分析.[结果]获得龙眼漆酶laccase基因2个转录本Dllac 7-a和DlLac 7-b的cDNA全长序列(KM103385和KM103386).DlLac 7-a和DlLac 7-b全长分别为2 121 bp和2 064 bp,包含相同的完整开放阅读框(ORF)1 713 bp,均编码570个氨基酸,2者仅3’非编码区(3'UTR)长度不同;该氨基酸序列与甜橙、毛果杨和葡萄等物种的laccase有较高的同源性.生物信息学分析表明,DlLac7的保守结构域具有漆酶的典型结构域特征.qPCR分析结果表明,在龙眼体胚发生过程中,DlLac7在鱼雷形胚时期的表达量最高,子叶胚阶段下调表达,其他阶段表达量平稳;DlLac7在龙眼成花中表达量最高,其次是花芽,在根中也有一定程度的表达,而在其他组织部位表达量较低.激素和非生物胁迫处理下的表达分析表明,水杨酸(SA)、低浓度茉莉酸甲酯(MeJA)、盐、渗透、干旱和脱落酸(ABA)胁迫等因素均可诱导DlLac7上调表达.[结论]DlLac7可能参与龙眼体胚发生中期的转录调控过程,且可能参与茉莉酸、SA和ABA的逆境胁迫信号转导途径,调控龙眼多种非生物胁迫应答过程.
关键词:龙眼体细胞胚胎发生漆酶非生物胁迫qPCR
分类号:S667.2(果树园艺)
资助基金:国家自然科学基金(No.31272149和No.31572088)福建省科技重大专项(2015NZ0002-1)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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果树学报

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北大核心CSTPCD
ISSN:1009-9980
年,卷(期):2016,33(10)
所属栏目:种质资源·遗传育种·分子生物学