华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VoUIRP3的抗白粉病特性分析
王辰
姚文孔
谢小青
童威霍
王磊
王杰
王跃进
1.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌7121002.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌7121003.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌7121004.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌7121005.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌7121006.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌7121007.西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,陕西杨凌712100
摘要：[目的]分析华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’的Ring型泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的转基因植株对葡萄白粉病的抗性,研究这2个基因的抗白粉病特性,为改良欧洲葡萄抗病性提供可用基因.[方法]利用同源克隆的方法获得中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的编码区序列(CDS);通过实时荧光定量PCR方法检测其在白粉菌诱导和水杨酸处理后的葡萄叶片中的表达;使用聚乙二醇(PEG)介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位;通过农杆菌介导法获得转基因‘无核白’和‘红地球’植株;经过苯胺蓝染色,利用血球计数板计数分析白粉菌在转基因植株叶片上的生长情况,鉴定转基因株系的抗病性.[结果]中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3响应白粉菌和水杨酸处理,表达模式明显区别于感病对照‘赤霞珠’.中国野生华东葡萄‘白河-35-1'VpUIRP2蛋白定位在细胞质,VpUIRP3蛋白定位无特异性.通过农杆菌介导的遗传转化获得4个VpUIRP2的转基因‘红地球’株系和1个‘无核白’株系,转基因株系对白粉病表现出抗性.[结论]中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2能增强葡萄对白粉病的抗性,可以作为抗病基因用于改良欧洲葡萄的抗病性.
关键词：中国野生华东葡萄泛素连接酶白粉病遗传转化表达分析
分类号：S663.1(果树园艺)
资助基金：国家自然科学基金(No.31171924)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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