山楂属植物中苹果褪绿叶斑病毒的RT-PCR检测及病毒脱除方法
郑文燕
郭巍
马跃
李晓明
代红艳
1.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108662.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108663.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108664.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,1108665.沈阳农业大学园艺学院,沈阳,110866
摘要：[目的]建立优化的山楂属植物苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的RT-PCR检测体系,获得以山楂组培苗为试材的高效ACLSV脱除方法.[方法]基于转录组高通量测序解析的山楂属植物ACLSV基因组序列设计病毒检测引物,比较cDNA模板浓度、Taq DNA聚合酶种类及采样部位对病毒RT-PCR检测效果的影响.通过组培苗热处理和培养基中添加三氮唑核苷来脱除山楂植株中的ACLSV.[结果]基于转录组高通量测序获得的2个ACLSV山楂分离物的全基因组序列设计并筛选出适合于山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测引物.建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系.对80份山楂样品进行病毒检测,其中有18个样本检测出ACLSV,带毒率为22.5％.比较了热处理(37℃、30d)、化学处理(培养基中添加20 mg·L-1的三氮唑核苷,处理40 d)、热处理与化学处理结合方法(处理30d)3种方法对山楂组培苗中ACLSV的脱除效率,表明热处理或热处理与化学处理结合的方法能够完全脱除山楂中的ACLSV,而单独化学处理的脱毒率不能达到100％.[结论]建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系,表明组培苗热处理是脱除山楂植株中ACLSV的有效方法.
关键词：山楂苹果褪绿叶斑病毒RT-PCR组培脱毒
分类号：S661.5(果树园艺)
资助基金：国家自然科学基金(31470678)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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