苹果MdRCD1基因的表达分析以及功能的初步鉴定
李浩浩
曲丰佳
安建平
李睿
郝玉金
王小非
由春香
1.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安2710182.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安2710183.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安2710184.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安2710185.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安2710186.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安2710187.山东农业大学园艺科学与工程学院·作物生物学国家重点实验室·农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,山东泰安271018
摘要：[目的]分离克隆苹果MdRCD1基因,分析其蛋白结构和逆境响应,并初步鉴定MdRCD1在苹果愈伤中的功能.[方法]同源克隆MdRCD1并测序,用DNAman和MEGA5相关软件分析MdRCD1氨基酸序列以及进化关系,不同逆境处理‘嘎拉’苹果组培苗,qRT-PCR分析MdRCD1在逆境条件下的表达量.农杆菌介导的遗传转化方法获得过量表达MdRCD1的转基因愈伤,不同盐浓度处理野生型和转基因愈伤,观察愈伤的长势,检测愈伤的鲜质量、脯氨酸和丙二醛含量,鉴定MdRCD1的初步功能.[结果]从‘嘎拉’苹果中克隆了MdRCD1 (MDP0000234325)基因.该基因ORF为1 803 bp.通过进化树和蛋白同源性分析,表明苹果MdRCD1和中国白梨PbRCD1进化亲缘关系最近.在MdRCD1的N端有1个保守的WWE结构域,1个PARP催化中心,在C端有1个RST结构域.qRT-PCR实验表明MdRCD1在苹果各个组织器官中都有表达,在茎中的表达量高于其他组织;同时MdRCD1的表达受NaCl、ABA、渗透胁迫等逆境胁迫的诱导.通过农杆菌侵染获得过量表达MdRCD1转基因苹果愈伤.盐胁迫处理条件下,过量表达MdRCD1的抗性明显提高.[结论]MdRCD1在进化过程中比较保守,苹果不同组织中都有表达,过量表达MdRCD1苹果愈伤的抗盐性得到提高.
关键词：苹果MdRCD1基因克隆表达分析盐胁迫
分类号：S661.1(果树园艺)
资助基金：公益性行业科研专项(21203075-3)国家自然科学基金(31471854)国家自然科学基金(31430074)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 525-533 )
英文信息