流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的细胞核提取液筛选与应用
赖彪1
吴传龙2
秦永华2
刘成明2
冯奇瑞2
叶自行2
胡桂兵2
王惠聪3
1.长江师范学院现代农业与生物工程学院,重庆涪陵,4081002.华南农业大学园艺学院,广州,5106423.长江师范学院现代农业与生物工程学院,重庆涪陵408100;华南农业大学园艺学院,广州510642
摘要：[目的]流式细胞术是目前测定植物倍性和基因组大小差异的最快、最有效的方法.建立适合荔枝的流式细胞术的方法,对荔枝倍性育种以及基因组大小的确定是必不可少的.[方法]笔者以荔枝的幼嫩叶片为材料,筛选适合荔枝的细胞核提取液配方,建立利用流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的方法.用改进的标准两步法,比较了6种常用细胞核提取液提取细胞核的效果.[结果]利用WPB (Woody Plant Buffer)提取的大部分荔枝品种(品系)叶片细胞核稳定、分辨率高、细胞碎片少且细胞G0/G1峰的变异系数(CV)较低,平均CV值为5.12％,说明该配方适用于酚类物质丰富的荔枝细胞核的提取.同时以已知染色体数量的‘无核荔’(2n=30)为外标,检测了18个品种(品系)的倍性,发现参测样品的G0/G1峰与‘无核荔’G0/G1峰的荧光均值的比值为0.78～1.24,说明所测荔枝品种(品系)均为二倍体.以已知基因组大小的‘Stupické polni rané’番茄为内标测定了14个品种(品系)的基因组大小,结果表明荔枝基因大小约为550～620Mb,平均602Mb,不同荔枝品种(品系)间基因组大小存在一定差异.[结论]WPB细胞核提取液提取的荔枝幼嫩的叶片的细胞核质量好,可用于流式细胞术荔枝倍性和基因组大小的测定,测定的结果显示参测荔枝品种(品系)均为二倍体,无单倍或多倍的情况,不同荔枝品种基因组大小有一定的差异.
关键词：荔枝流式细胞术细胞核提取液倍性基因组大小
分类号：S667.1(果树园艺)
资助基金：现代农业产业技术体系建设专项(CARS-33)长江师范学院校级科研项目(2016KYQD20;2016XJQN06)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 939-946 )
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