西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用
焦楠
朱宁
程春振
林玉玲
李汉生
陈发兴
赖钟雄
1.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500022.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500023.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500024.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500025.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500026.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,3500027.福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福州,350002
摘要：[目的]建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus,TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系.[方法]根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化.[结果]优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mool· L-1和8.0 mmol· L-1;最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次.[结论]灵敏度分析结果显示,在样品cDNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带.同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV.本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利.
关键词：西番莲夜来香花叶病毒黄瓜花叶病毒病毒检测双重RT-PCR技术
分类号：S667.9(果树园艺)
资助基金：福建省高原学科建设经费(102/71201801101)福建农林大学水果产业乡村振兴服务团队项目(102/69914001003)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 947-953 )
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