山核桃实时荧光定量PCR分析中内参基因的筛选与验证
赵艺蕊
黄春颖
王克涛
徐一帆
王建华
邢语琳
陶瞫宸
黄坚钦
李岩
浙江农林大学,浙江临安311300
摘要:[目的]筛选出山核桃中的最佳内参基因.[方法]以山核桃的根、茎、叶、柱头、果皮、胚、不同处理下的叶片及嫁接后的砧木和接穗为试验材料,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder4种软件对10个管家基因家族(ARF、ACT1、ACT7、MPS、UBC9、CYP、60SRP、EF-1α、GAPHD和HIS)中的19个候选内参基因表达的稳定性进行综合分析.[结果]通过比较不同组织内参基因表达的稳定性,排名前五的5个基因(ARF-1、60SRP、ACT7-1、ACT1-1和UBC9-5)被选出且ARF-1和60SRP的表达最稳定.geNorm分析显示:在盐、干旱及嫁接处理后,60SRP的表达最稳定;外源喷施不同激素到山核桃叶面后,UBC9-5的表达最为稳定;综合所有组织和处理发现UBC9-5为最稳定表达的基因.NormFinder和RefFinder综合分析的结果与geNorm分析结果基本一致,而与BestKeeper分析相差较大.[结论]在山核桃的不同组织及不同试验处理中,最适的内参基因有所不同,其也受分析方法的影响.
关键词:山核桃组织内参基因实时荧光定量PCR
分类号:S664.1(果树园艺)
资助基金:省级财政林业科技推广项目(2021B02)浙江省重点研发专项(2021C02037)浙江省农业新品种选育重大科技专项(2021C02066-12)
论文发表日期:2022-01-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:12( 10-21 )
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