COP9亚基FaCSN5在草莓果实发育过程中的功能分析
高佳慧1
冀桂明2
李文静2
郭家选2
沈元月1
高凡2
1.北京农学院植物科学技术学院·农业应用新技术北京市重点实验室,北京 1022062.北京农学院生物与资源环境学院·农业农村部华北都市农业重点实验室,北京 102206
摘要：[目的]探究草莓COP9信号复合体亚单位5(constitutive photomorphogenic signalosome subunit 5,CSN5)在草莓果实发育过程中的功能.[方法]以草莓品种红颜为材料,根据草莓果实发育过程中的转录组数据,筛选并克隆FaC-SN5基因.基于生物信息学对其功能域、理化性质、蛋白结构等进行预测.通过SDS-PAGE和Western Blot检测FaC-SN5-His目的蛋白,利用烟草对其进行亚细胞定位分析.利用RT-qPCR检测FaCSN5的时空表达水平,利用农杆菌介导瞬时侵染草莓果实,观察记录表型,检测FaCSN5基因表达水平.利用圆片温育和外源激素处理试验检测外源激素对FaCSN5基因表达的诱导影响.[结果]系统进化树分析表明FaCSN5、FvCSN5和月季CSN5b同源性较高,相似率分别为100%和94.24%.克隆的FaCSN5与艳丽草莓8条基因序列的碱基和氨基酸序列相似率分别达98.97%和99.35%.FaCSN5基因的编码区为1080 bp,编码359个氨基酸,具有一个保守的MPN结构域.pET30a-FaCSN5融合表达载体的大肠杆菌原核表达表明FaCSN5-His目的蛋白大小约66 ku.亚细胞定位显示FaCSN5-GFP融合蛋白定位为细胞核和细胞质.FaCSN5在根中表达水平最高,在种子中最低,在根中的表达量是种子中表达量的8倍;果实发育过程中在全红期表达量最高,在褪绿期表达量最低,从褪绿期开始随着果实发育表达量升高.农杆菌介导瞬时侵染草莓果实,FaCSN5过表达能够促进草莓果实成熟;沉默FaCSN5表达则会抑制草莓果实成熟.FaCSN5启动子上含有响应茉莉酸甲酯和赤霉素的顺式作用元件,且其表达受到这两种激素及脱落酸的诱导.[结论]FaCSN5可能是通过多种激素调控促进草莓果实成熟.
关键词：草莓红颜CSN5表达分析亚细胞定位激素诱导
分类号：S668.4(果树园艺)
资助基金：国家自然科学基金(32272648)国家自然科学基金(32072516)国家自然科学基金(32030100)
论文发表日期：2023-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：12( 2536-2547 )
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