农杆菌介导的厚皮甜瓜遗传转化体系的建立
唐伶俐1
徐龙兰2
徐永阳1
贺玉花1
田小琴2
张健1
孔维虎1
李文东3
赵光伟1
1.中国农业科学院郑州果树研究所,郑州 450009;三亚中国农业科学院国家南繁研究院,海南三亚 5720002.中国农业科学院郑州果树研究所,郑州 4500093.潍坊创科种苗有限公司,山东昌乐 262400
摘要：[目的]遗传转化是进行基因功能验证的重要手段,构建较为完善、高效的厚皮甜瓜遗传转化体系,为基因功能验证和厚皮甜瓜种质改良提供技术支撑.[方法]以厚皮甜瓜B8为材料,用携带植物双元表达载体pQY002005的根癌农杆菌介导转化B8子叶诱导再生,通过探究影响甜瓜遗传转化过程中的重要因子的作用,建立以B8为基础的甜瓜遗传转化体系.[结果]以正常光周期培养3 d的无菌苗子叶节为外植体,对其进行微刷+10 s超声处理可提高农杆菌侵染效率,荧光芽获得率达29.6％;压力85 kPa的2次5 min的抽真空侵染方式(间隔1 min)侵染效果较佳;4 mg·L-1的Basta较适宜筛选抗性植株.利用以上方法,单次转化120个子叶节外植体,可获得31个再生荧光芽,17株生根苗,通过PCR检测确定8株阳性苗,阳性率达58.8％,阳性植株获得率为6.7％.[结论]成功建立了以B8为材料的甜瓜高效遗传转化体系,为甜瓜关键基因功能验证和种质精准改良提供技术支持.
关键词：厚皮甜瓜遗传转化苗龄侵染方式抗性芽筛选
分类号：S652(瓜果园艺)
资助基金：现代农业产业技术体系(CARS-25-2023-G6)中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-2022-ZFRI)海南省重点研发计划(ZDYF2021XDNY164)河南省重大科技专项(221100110400)河南省科技攻关计划项目(232102110185)
论文发表日期：2024-03-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 533-542 )
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