刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析
刘洁
杨盛迪
曾雅婷
白描
杨国顺
李双江
湖南农业大学园艺学院·湖南省葡萄工程技术研究中心,长沙 410128
摘要：[目的]探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析.[方法]克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位;同时,通过在己糖缺陷型酵母菌株EBY.VW4000中异源表达VdERD6L15探究其功能;此外,通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核心区域.[结果]成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列,该编码序列长1461 bp,可编码486个氨基酸,具有膜蛋白特征,属于单糖转运蛋白家族.亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上.通过在酵母菌株EBY.VW4000中进行异源表达,验证了 VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力.利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动子顺式作用元件进行分析,发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件.通过GUS染色分析,进一步确定候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500 bp到-1000 bp之间.[结论]VdERD6L15是一个定位在液泡膜上的糖转运蛋白,具有转运葡萄糖的功能;VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500～1000 bp之间.
关键词：刺葡萄VdERD6L15单糖转运蛋白亚细胞定位启动子活性
分类号：S663.1(果树园艺)
资助基金：国家重点研发计划(2023YFD1200100)国家自然科学基金(32202531)现代农业产业技术体系(CARS-29-Zp-9)
论文发表日期：2024-09-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 1770-1780 )
英文信息