人羊膜上皮细胞的分离培养及其免疫原性初步研究
彭琳1
王建2
卢光琇2
1.中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,4100782.410078,长沙,中南大学生殖与干细胞工程研究所;人类干细胞国家工程研究中心
摘要：目的:分离培养人羊膜上皮细胞(HAEC),通过与同种异体淋巴细胞混合培养探讨HAEC的免疫原性,为进一步的临床研究提供指导.方法:体外分离培养HAEC,透射电镜观察细胞超微结构,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和细胞免疫荧光方法检测上皮细胞相关基因及细胞表面标记细胞角蛋白CK18表达情况.与同种异体外周血来源淋巴细胞建立混合淋巴细胞(the mixed lymphocyte reaction,MLR)反应体系,通过MTT去检测细胞增殖率.结果:分离得到的HAEC具有上皮细胞特异性的微绒毛结构,表达上皮细胞相关基因CDHl,claudin 3和claudin4,并表现为细胞角蛋白CK18阳性.MTT分析检测OD值结果显示,在HAEC细胞与淋巴细胞浓度分别为1∶2000,1∶200和1∶20时各组的OD值分别为0.074±0.022,0.049±0.012和0.019±0.011.结论:从羊膜中分离得到的HAEC表达CK18,且免疫原性较低.
关键词：细胞培养技术上皮细胞羊膜细胞培养的逆转录聚合酶链反应荧光免疫测定
资助基金：国家自然科学基金(30700272)教育部高等学校博士学科点专项科研基金(422201017)湖南省科技计划(2009FJ3180)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 272-274,封3 )
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