重组降血压肽表达系统的构建及表达多肽的鉴定
王小莉
刘冬
梁世中
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510006
摘要：通过对降血压肽结构和功能的分析,设计合成了一条小肤VPVLPK.通过测定其对ACE酶的抑制活性,发现此肽具有很好的降血压活性IC50为4.2μmol/L.根据大肠杆菌偏爱密码子人工合成此肽的6拷贝片段,将其克隆至表达载体pET-15b并转化到宿主菌E.coil BL21(DE3)中.筛选阳性克隆,通过双酶切、PCR及测序表明,本研究已成功构建出重组降血压肽质粒pET-15b-ACEIP的表达系统.IPTG诱导表达后的菌体通过Tricne-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测在5.8～7.8kDa之间出现目的蛋白条带,这与理论蛋白分子量6.2kDa相符,且目的蛋白主要存在于超声破碎的上清液中.上清液用胰蛋白酶酶切后,通过HPLC鉴定证实为目的多肤,且多肤的含量达130mg/L.
关键词：降血压肽序列设计pET-15b-ACEIP构建表述鉴定
分类号：TQ936.1(其他化学工业)
资助基金：广东省科技计划工业攻关项目(粤科计字[2006]119号)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 129-132,161 )
英文信息