一步亲和纯化蒜氨酸酶及其酶学性质研究
吴熙然1
胡红华1
张相年2
赵树进2
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510641;广州军区广州总医院,广东,广州,5100102.广州军区广州总医院,广东,广州,510010
摘要:以自制S-烷基-L-半胱氨酸为配基的亲和凝胶直接从独头蒜粉碎液中提取蒜氨酸酶.用自制亲和凝胶吸附蒜氨酸酶后,考察含0.2 mol·L-1葡萄糖溶液的洗脱效果.利用SDS-PAGE对酶纯度进行检验,并研究温度、pH和底物浓度对酶活性的影响.结果表明,利用葡萄糖溶液洗脱,得到8.29倍的纯酶.而阴性对照纯化倍数为3.78倍.提纯的蒜氨酸酶为电泳纯,亚基约为50 kDa和44 kDa.以合成的蒜氨酸为底物,蒜氨酸酶的最适温度是40℃,最适pH4.92,Kin为19.795μmol·mL-1,Vmax=8.446 μmol·mg-1·min-1.
关键词:蒜氨酸酶分离纯化亲和层析
分类号:Q814(酶工程)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 366-368 )
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