耶氏酵母菌POX5基因的敲除
黄琳1
刘常金1
王芳1
师慧敏1
张治洲2
1.天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,3004572.天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;哈尔滨工业大学(威海)科学与工业技术研究院,山东威海,246209
摘要：对于耶氏酵母(Yarrowia lipolyaca)中编码与γ-癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因(POX1-POX5)中的POX5基因用Cre/loxP同源重组系统进行敲除.设计含有60个核苷酸与POX5基因的ORF两侧序列同源的长引物,以pUG6为模板构建带有Cre/loxP系统的敲除组件,之后转化耶氏酵母YL(Yarrowia lipotytica),通过PCR确定阳性克隆子.将质粒pSH65转入阳性克隆子,半乳糖诱导表达Cre酶以切除KanMX基因并经过PCR确认.最后在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,成功获得POX5缺陷型菌株.
关键词：耶氏酵母POX5基因基因敲除Cre/loxP系统γ-癸内酯
资助基金：新世纪优秀人才支持计划(2006;hitwh200904)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 331-336 )
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