特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究
徐爱群
曹以诚
区镜深
张珍武
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100064.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
摘要：本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和Western Blot方法分别检测转染前后mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白表达水平,比较对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1的抑制效果.结果表明,Rt-PCR结果显示对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1均可降低mcl-1 mRNA水平,最大抑制效率达70.0%,远高于作为对照非相关组;Western-Blot结果显示转染特异性siRNA重组质粒后Mcl-1蛋白表达受到抑制,最大抑制率为44.2%.合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调mcl-1 mRNA水平,能有效抑制Mcl-1蛋白表达.
关键词：肝癌mcl-1基因沉默实时荧光定量PCR
资助基金：国家自然科学基金(90412015)教育部中国家电网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130)国家科技基础条件平台建设计划(2005DKA64001;2005DKA64001)广州市科技攻关计划(2005Z12E4023)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 789-792,783 )
英文信息