人α-防御素5前体蛋白在毕赤酵母中分泌表达的研究
汪芳1
吴晖1
李健兴2
余以刚1
李晓凤1
袁琨1
王少沛2
唐语谦1
1.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州,5106402.广州清绿健康科教发展有限公司,广东广州,511400
摘要：为了探索人α-防御素5(HD5)前体蛋白基因在酵母中高效分泌表达的可行性,将其对应基因克隆重组载体pPIC9K-preproHD5,经Sacl线性化后,转入Pichia pastoris GS115,得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-preproHD5.应用PCR技术筛选高拷贝转化株,用BMGY培养GS115/pPIC9K-HD5至OD600为2～6时,用BMMY诱导培养120 h,离心取上清液,用Tricien-SDS-PAGE和蛋白定量试剂盒分析人α-防御素5前体蛋白的表达量.琼脂扩散法检测人α-防御素5前体蛋白的抑茵活性,发现其对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠杆菌(ATCC10231)2种标准菌株具明显的抑菌活性.人α-防御素5前体基因可在毕赤酵母实现分泌型表达,该策略可能成为防御素工业化开发的有效途径.
关键词：人α-防御素5前体蛋白分泌表达生物活性
资助基金：番禺区科技计划(2006-Z-58-1)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1181-1184,1216 )
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