植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ在大肠杆菌中的表达
王昌博
黄东彦
胡文锋
罗文华
李雪玲
颜少帆
陈永泉
1.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,5106422.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,5106423.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,5106424.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,5106425.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,5106426.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,5106427.华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室,广东广州,510642
摘要:本研究从马槟榔种子中扩增得到天然植物甜蛋白MabinlinⅡ的全长cDNA序列(M1),并通过特异引物PCR去除部分5'端序列得到修饰型的基因序列(M2).将M1与M2分别克隆至表达载体pET43.1a(+),并分别转化表达宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)和Rosetta(DE3),成功构建出BL21(DE3)/pET43.1a-M1(缩写B-M1)、BL21(DE3)/pET43.1a-M2 (缩写B-M2)、Rosetta(DE3)/pET43.1a-M1(缩写R-M1)、Rosetta(DE3)/pET43.1a-M2(缩写R-M2)四个表达系统.经IPTG诱导表达后证明,R-M1的重组甜蛋白表达量最高,并可检测到轻微甜味和后甜感.同时利用镍柱对R-M1诱导表达的目的蛋白进行纯化,得到单一条带的重组甜蛋白.
关键词:甜味蛋白马槟榔MabinlinⅡ大肠杆菌诱导表达
资助基金:广东省科技厅工业科技攻关计划重大项目(2008A010900003)生物源生物技术(深圳)有限公司项目(BF200801)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 384-389 )
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现代食品科技

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北大核心CSTPCDEI
ISSN:1673-9078
年,卷(期):2011,27(4)
所属栏目:基础研究