从黑曲霉固态发酵产物中纯化α-L-鼠李糖苷酶及酶法制备普鲁宁
胡群芳1
李利君2
陈艳红1
倪辉3
肖安风3
陈峰4
蔡慧农3
1.集美大学生物工程学院,福建厦门3610212.福建省食品微生物与酶工程重点实验室,福建厦门3610213.集美大学生物工程学院,福建厦门361021;福建省食品微生物与酶工程重点实验室,福建厦门361021;厦门市食品与生物工程技术研究中心,福建厦门3610214.集美大学生物工程学院,福建厦门361021;美国克莱姆森大学食品科学、营养与包装科学系,南卡罗琳娜州29634
摘要：本文研究了从黑曲霉固态发酵产物中纯化α-L-鼠李糖苷酶,并探究利用该酶转化柚皮苷制备普鲁宁.用黑曲霉固态发酵柚皮产生α-L-鼠李糖苷酶,通过40％～80％酸铵沉淀、疏水层析、亲和层析和凝胶过滤层析,从黑曲霉固态发酵产物中分离纯化得到了1种α-L-鼠李糖苷酶;该酶为单体分子量约为160 kDa;它由二硫键连接的两个肽段构成,其中有一个大肽段分子量约为130 kDa.其水解柚皮苷的最适温度为50～60℃,最适pH 4.0～5.0,米氏常数和最大酶反应速度分别为0.24 μmol/mL和312.5 U/mL.用该酶转化柚皮苷制备普鲁宁的最适反应时间为60～90 min,柚皮苷转化率达98％以上.转化产物中普鲁宁的含量在95％以上,普鲁宁的分解产物柚皮素的含量小于5.0％.用从黑曲霉固态发酵产物中纯化的α-L-鼠李糖苷酶制备普鲁宁具有热稳定性好、底物亲和力强、转化率高和副产物少等优点,为开发酶法制备普鲁宁的工艺提供了重要参考.
关键词：黑曲霉固态发酵α-L-鼠李糖苷酶纯化柚皮苷普鲁宁
资助基金：国家自然科学基金(31371751)集美大学科研创新团队项目(2010A006)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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