沙蚕活性蛋白酶诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的机制研究
张国梅1
杨最素1
丁国芳2
黄芳芳1
赵玉勤1
1.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山3160222.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山316022;浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316021
摘要：本文探讨了沙蚕活性蛋白酶(Nereis active protease,NAP)诱导SPC-A-1细胞凋亡机制.采用MTT法检测NAP对SPC-A-1细胞的抑制作用,倒置显微镜及AO/EB染色观察SPC-A-1细胞的形态学的变化,采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率和细胞膜电位的变化;并通过Western Blotting检测细胞中凋亡相关蛋白的表达变化.NAP对SPC-A-1细胞活性具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间的依赖性;NAP作用后细胞出现凋亡的形态学特征;经流式细胞术检测结果显示,随着NAP作用浓度的增加,SPC-A-1细胞的早期凋亡率从13.50％提高到22.98％,且线粒体膜电位下降所占的百分率从12.95％提高到25.28％. Western Blotting结果显示,50 μg/mLNAP作用24 h后,Bax/Bcl-2的比率相对对照组明显增加了6.05倍;Cyt-C、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP 等含量显著上调,相对表达量分别达到对照组的2.32、3.07、3.68、1.36倍.NAP诱导SPC-A-1细胞凋亡的作用机理有可能是通过下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达,进而诱导线粒体膜电位的下降,促使Cyt-C的转移以及激发Caspase家族发生级联反应最终导致SPC-A-1细胞的凋亡.
关键词：海洋药物沙蚕蛋白酶抗肺癌细胞凋亡
资助基金：国家自然科学基金(81273429)浙江省科技厅重大专项(2011C02003)浙江省科技厅重大专项(2010R50029)浙江省科技厅重大专项(2013C03036)浙江省自然科学基金立项项目(LY12C20005)浙江省自然科学基金立项项目(LY12C20008)舟山市科技计划(2012C21013)舟山市科技计划(2012C23023)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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