胶质芽孢杆菌葡萄糖磷酸变位酶基因的克隆、表达与酶学性质研究
唐家毅1
蓝东明2
王永华2
杨博1
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100062.华南理工大学轻工与食品学院广东广州510641
摘要：胶质芽孢杆菌所产胞外多糖作为絮凝剂在食品工业废水处理方面比传统的工业絮凝剂具有更好应用效果而引起了广泛的关注.葡萄糖磷酸变位酶(PGM,EC 5.4.2.2)能将葡萄糖-6-磷酸转变成葡萄糖-1-磷酸而被认为是多糖合成路径上的关键酶之一.本研究克隆获得来源于自胶质芽孢杆菌GIM1.16编码PGM的基因pgm.序列分析表明,该基因包含一个1710bp的读码框.在大肠杆菌中表达了pgm基因并纯化了重组蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示重组的PGM分子量约为63 kDa.重组的PGM最适反应温度为40℃,但当反应温度超过55℃时,PGM基本丧失活性,PGM在酸性(pH 4-～6)及碱性溶液(pH 8.5～10)中均表现出低活性,其最适合反应pH值为7.5.PGM对底物葡萄糖-1-磷酸的Kcat和Km值分别为684 min-1和0.24 mM-1.本研究为胶质芽孢杆菌菌株的基因工程改造和代谢工程研究奠定了坚实基础.
关键词：胞外多糖胶质芽孢杆菌葡萄糖磷酸变位酶
资助基金：广东省自然科学基金(S2012040007734)中央高校基金项目(2014ZM0062)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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