基于光谱法研究异细交链孢菌酮酸半抗原-抗体的相互作用
王雅丽
王锋
王弘
杨金易
徐振林
沈玉栋
肖治理
雷红涛
孙远明
1.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106422.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106423.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106424.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106425.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106426.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106427.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106428.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州5106429.华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,广东广州510642
摘要：本文采用紫外可见光谱(UV-Vis)、荧光光谱和圆二色谱(CD)技术研究了异细交链孢菌酮酸单克隆抗体(McAb)与其半抗原(IteAH).之间的相互作用并用ELISA方法对荧光结果进行了验证.结果表明,ITeAH对McAb有荧光猝灭作用,淬灭机理主要为静态猝灭且遵循非辐射能量转移理论.在298、310、318K3个温度下,ITeAH与McAb的结合常数分别为1.9× 106、1.6×106、1.4× 106 L/moL,结合位点数n≈1,结合距离r为3.35 nm,经ELISA测得的结合常数与荧光分析的结果较一致.由结合作用过程的热力学参数可知,两者之间以静电引力为主要作用力,不同pH下,由ELISA结果可推测其影响了ITeAH与抗体结合.同步荧光光谱显示ITeAH的加入并未使抗体的酪氨酸和色氨酸残基附近的微环境发生明显改变,两者的结合位点更倾向于酪氨酸残基,圆二色谱分析发现ITeAH与McAb相互作用后,抗体的二级结构发生明显变化.
关键词：异细交链孢菌酮酸单克隆抗体紫外可见光谱荧光光谱圆二色谱
资助基金：国家自然科学基金(30871755)国家自然科学基金(31271866)国家科技支撑计划(2012BAD31B0302)广州市科技计划(2013J4100053)广州市科技计划(2013J2200080)广州市科技计划(2014J4100185)广东省自然科学基金(S2012010010323)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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