可降解玉米赤霉烯酮的重组过氧化物酶A4-Prx的纯化与活性研究
钟凤
吴晖
刘思利
唐语谦
1.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州,5106402.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州,5106403.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州,5106404.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州,510640
摘要：以来源于不动杆菌Acinetobacter sp.SM04的过氧化物酶A4-Prx的毕赤酵母工程表达菌株GS 115/pPIC9K-A4-Prx为研究对象,从培养液中纯化重组过氧化物酶A4-Prx,分析其ZEA降解活力,并研究过氧化物酶A4-Prx的酶学特性.本论文首先研究了蛋白的纯化方法,通过一系列分离纯化手段得到纯的过氧化物酶A4-Prx,最终纯化倍数约为12,HPLC实验结果表明纯化后的过氧化物酶A4-Prx具有ZEA降解能力,且ZEA降解率达到63％.对过氧化物酶A4-Prx进行酶学特性研究,结果表明,pH和温度均对A4-Prx的过氧化物酶酶活有显著影响,pH 9.0和反应温度60℃时酶活最高,A4-Prx的最大酶活是204.1U,此时过氧化氢浓度为9.7mM.A4-Prx过氧化物酶反应受EDTA的抑制作用明显.本研究为过氧化物酶的酶学研究奠定了基础,为后续的A4-Prx降解机理研究提供先决条件,推动生物降解ZEA研究的进展.
关键词：过氧化物酶玉米赤霉烯酮毕赤酵母酶学特性
资助基金：国家自然科学基金(31201330)广州市科技攻关计划(20130000202)粮食公益性行业科研专项(201313005)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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