基于同源建模与分子对接技术构建抗Bt Cry1类毒素单链抗体定点饱和突变库
焦凌霞1
徐茜茜2
刘媛3
张霄3
刘贝贝3
梁颖3
刘贤金3
1.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室,江苏南京210014;河南科技学院食品学院,河南新乡4530032.河南科技学院食品学院,河南新乡,4530033.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室,江苏南京,210014
摘要:转基因食品中苏云金芽胞杆菌(Bt) Cry毒素种类较多,对生态环境和食品安全等造成的潜在风险日益受到关注,制备针对多种Cry毒素的高效广谱抗体,进而建立广谱性快速检测方法,是对转Bt基因作物进行监管并确保生态环境和食品安全的基础.本研究利用基因工程抗体易于定向修饰及Cry毒素具有相似结构的特点,以实验室前期获得的人源化抗苏云金芽胞杆菌(Bt) Cry1Ac毒素单链抗体为材料,通过同源建模模拟单链抗体及五种Cry1类毒素的三维结构并利用分子对接技术分析单链抗体与Cry1类毒素结合的关键氨基酸位点;在此基础上利用重叠延伸PCR技术对关键氨基酸位点及其邻近位点进行定向改造,以构建定点饱和突变库,为筛选检测多种Cry1类毒素的广谱特异性抗体提供实验材料.
关键词:Cry1毒素单链抗体同源建模分子对接重叠延伸PCR定点饱和突变
资助基金:国家自然科学基金(31371778)国家自然科学基金(31201535)江苏省博士后科研项目(1401016A)江苏省农业科技自主创新项目(cx(13)3087)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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