麦芽低聚糖生成酶在枯草芽孢杆菌中的分泌表达及其酶学性质研究
潘思惠1
任俊彦1
李克1
丁宁1
顾正彪2
李才明2
李兆丰2
1.江南大学食品学院,江苏无锡,2141222.江南大学食品学院,江苏无锡214122;江南大学食品安全与营养协同创新中心,江苏无锡214122
摘要：首先构建了来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)STB04的麦芽低聚糖生成酶(MFA酶)的枯草芽孢杆菌分泌表达系统,并对含表达载体的枯草芽孢杆菌WB600产重组酶的发酵条件进行了优化,发现以TB为发酵培养基、发酵温度为30℃时,有利于重组酶的分泌表达.其次,通过疏水和强阴离子交换色谱对重组酶进行了分离纯化,得到了电泳纯的酶.最后,对重组酶的酶学性质和产物合成进行了分析,结果显示:它在溶液中为单聚体,最适反应温度为45℃,且在该温度下半衰期为30 min;最适反应pH为6.5,且具有很好的pH稳定性;酶活力对金属离子存在一定依赖性并受F3++和Sn2+等重金属离子的显著抑制;重组MFA酶的动力学性质可以用米氏方程进行很好的描述,对麦芽糊精的水解速率最高;重组酶作用不同来源原淀粉及麦芽糊精的主要产物均为麦芽三糖、麦芽四糖和麦芽五糖,且以麦芽五糖为最高.
关键词：麦芽低聚糖生成酶分泌表达性质产物合成
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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