肠道菌群中鼠李糖乳杆菌的菌落免疫印迹计数与分离
杨振泉1
贡湘磊2
叶平3
谢鑫2
张宇2
高璐2
饶胜其2
尹永祺2
1.扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州 225127;江苏省乳品生物技术与安全控制重点实验室,江苏扬州 2251272.扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州,2251273.泰州市产品质量监督检验所,江苏泰州,225309
摘要：本研究通过制备鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus,Lr)菌毛蛋白FimI特异性抗体,建立了Lr菌落免疫印迹计数与分离方法.将重组FimI蛋白(rFimI)免疫BALB/c小鼠获得抗血清,用Western和全菌Dot-Blot鉴定抗血清的反应性和特异性,建立基于rFimI抗血清的菌落免疫印迹方法,并对模拟样品(小鼠肠道菌群+Lr)以及灌胃小鼠粪便中的Lr进行定量分析.结果显示获得的rFimI抗血清效价为1:51200,该血清和Lr裂解蛋白和菌体均呈强阳性反应,与小鼠肠道菌群没有交叉反应.菌落免疫印迹中rFimI抗体最佳浓度为1:2000,所有含有Lr样品的菌落转印膜上都能呈现清晰的免疫印迹,测定的阳性菌落数和模拟样品中预设的Lr浓度一致,并能较好的反应灌服Lr的小鼠粪便中Lr的消长趋势.本研究建立的菌落免疫印迹方法为肠道样品中Lr的选择性计数和分离提供了快捷的方法.
关键词：鼠李糖乳杆菌菌落免疫印迹计数分离
资助基金：国家自然科学基金(31371806)江苏省高等学校自然科学研究项目(15KJA550004)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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