双基因敲除减毒单增李斯特菌(△actA/△inlB)的构建及其生物学初步鉴定
丁承超1
曾海娟1
钟菲菲2
陈国薇1
董庆利1
谢曼曼1
吴嫚1
刘武康1
刘箐1
1.上海理工大学医疗器械与食品学院,上海,2000932.湖南省长沙市食品质量安全督检测中心,湖南长沙,410013
摘要：减毒单增李斯特菌具有成为疫苗活载体的潜力,可同时引起MHC Ⅰ和MHC Ⅱ类抗原递呈系统,具有强烈激发CD8+和CD4+细胞免疫的能力.构建毒力基因缺失菌株进而评估其生物活性对于其作为疫苗活载体的开发尤为重要.本文采用同源重组技术构建单缺失菌株Lm-△actA和双缺失菌株Lm-△actA △/inlB,从生长状态、毒力基因表达和对HepG2细胞侵袭能力方面探讨减毒菌株生物学特性.生长活性测定显示两种减毒菌株和野生型Lm(EGD-e)三者生长状况无差异;实时定量PCR结果显示actA基因缺失后,inlA基因表达水平上升两倍;actA和inlB基因双缺失后,plcB和hly基因的表达水平都有较大幅度的上升;侵袭HepG2细胞结果显示actA基因缺失后侵袭能力增强、actA和inlB基因共同缺失后侵袭能力减弱.因此,减毒菌株的构建及其生物特性研究不仅对食源性致病菌Lm致病机理具有重要意义,也为构建预防人类和动物疫病的疫苗载体奠定了基础.
关键词：减毒单增李斯特菌疫苗载体actAinlB生物特性细胞侵袭
资助基金：国家自然科学基金(31371776)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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