黑曲霉液态发酵产柚苷酶的分离纯化及其性质研究
王维娜1
李佥1
田晶1
费旭2
徐龙权2
廉萌1
1.大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,1160342.大连工业大学现代教育技术部,辽宁大连,116034
摘要：本文针对黑曲霉液态发酵所产柚苷酶的分离纯化工艺及其酶学性质进行研究.将黑曲霉液态发酵所产酶液,依次通过30％～70％硫酸铵盐析、膜透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析后得到高纯度柚苷酶.经SDS-PAGE凝胶电泳仅得到一条清晰条带,分子量约为65.10ku.纯化获得的柚苷酶比酶活可达6932.54U/mg,纯化倍数和酶活回收率分别为13.82倍和13.30％,并且能有效水解柚皮苷.进一步研究发现,该酶的最适反应pH为4.5,最适作用温度为50℃,在20℃～50℃及pH 3.0～6.0范围内有良好的稳定性.在一定浓度范围内,K+、Ca2+和Na+对柚苷酶活性有促进作用,而Fe3+、SDS和EDTA-Na2对其活性有明显的抑制作用.本研究为深入理解柚苷酶分离纯化过程,明确其酶学性质,进一步探索柚苷酶应用于天然活性产物生物转化过程的相关机制提供了基础数据,具有非常重要的科学意义和潜在的应用价值.
关键词：黑曲霉液态发酵柚苷酶纯化酶学性质
资助基金：辽宁省自然科学基金(2013020167)辽宁省教育厅科学研究一般项目(L2015045)大连工业大学青年基金(67007908)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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