猪皮胶原ACE抑制肽的纯化与鉴定
张莹1
王宏艳2
马良1
黄丹丹1
刘轶1
张宇昊1
1.西南大学食品科学学院,重庆,4007152.河北金融学院基础教育部,河北保定,071051
摘要：采用超声协同稀碱对猪皮实施预处理后,酶解30min制得的高血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性水解液为原料,采用SephadexG-15、半制备高效液相色谱分离纯化其中胶原ACE抑制肽并对其序列进行鉴定.结果表明,SephadexG-15分离胶原ACE抑制肽的最佳分离条件为:样品浓度100 mg/mL;上样量2mL;流速2mL/min;洗脱剂为蒸馏水;层析柱为l m×lo mm的层析柱.在该分离条件下,混合肽被分成AP-Ⅰ、AP-Ⅱ两个组分,IC50值分别为19.50、1.01 mg/mL.对抑制活性较强的AP-Ⅱ进一步采用半制备高效液相色谱进行分离,得到8个组分峰,其中峰2、峰5和峰6的IC50值最小,分别为0.73、0.44和0.4 mg/mL.结合IC50值的大小及半制备收集到样品的量,对峰2和峰6采用LC-MS/MS进行序列分析.结果显示峰2的多肽序列为QGPPGPAGPR(P为Hyp),峰6的序列为AGPPGPPGPA,这两个序列位于胶原蛋白al链中526～535、730～739位.
关键词：胶原蛋白ACE抑制肽分离纯化结构鉴定
资助基金：国家自然科学基金(31301425)中央高校基本科研业务费专项重大项目(XDJK2015A015)中央高校基本科研业务费专项团队项目(2362014xk11)中国博士后科学基金面上项目(2014M562267)中国博士后科学基金特别资助项目(2015T80951)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息