基于细胞组学技术提高胶球藻C-169中性脂染色的有效性
魏东
李露
1.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106402.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,510640
摘要：本研究基于流式细胞仪、荧光酶标仪、激光共聚焦扫描显微镜等细胞组学分析技术,系统研究了藻液细胞浓度、Nile Red浓度、助溶剂种类和浓度,以及染色温度、染色时间、振荡时间等对检测藻细胞中性脂相对含量(以平均荧光强度表示)的影响,提高了胶球藻C-169中性脂染色的有效性.结果表明,Nile Red荧光染色的最佳藻细胞浓度为106 mL,染料浓度在0.05～0.2 μg/mL之间较适宜且不会产生过量的荧光干扰;添加15％～30％(V/V)丙三醇能显著增强染料进入细胞的通透性;25～40℃范围内胶球藻染色后的荧光强度较强但无显著差异(p＞0.05);染色时间超过10 min及振荡时间超过30 s均未显著提高胶球藻C-169染色后的平均荧光强度.系统优化后的染色方法可从细胞水平上显著提高中性脂荧光检测的精确性,同时为其他微藻采用这一荧光探针快速测定中性脂含量提供了快速有效方法.
关键词：胶球藻C-169细胞组学流式细胞术Nile Red中性脂
资助基金：国家自然科学基金(31370383)国家高技术研究发展计划（863计划）(2013AA065802)广东省海洋渔业科技与产业发展专项(A201401C01)广东省公益研究与能力建设项目(2015A020216003)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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