构建融合蛋白提高重组葡萄糖异构酶的催化性能
邓辉1
王广林2
陈乃东3
韦传宝3
1.皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;中科院云计算中心公共安全研究院,广东东莞523808;六安市蛋白质分离与纯化研究中心,安徽六安23701232.皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;中科院云计算中心公共安全研究院,广东东莞5238083.皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;六安市蛋白质分离与纯化研究中心,安徽六安2370123
摘要：为研究Ⅱ型Xylose/Glucose的N端蛋白序列对Ⅰ型Xylose/Glucose的作用,实验将源自超嗜热菌Thermoanaerobacter thermohydrosulfuricus的Ⅱ型葡萄糖异构酶(TTGIase)N端31个氨基酸序列融合到嗜热菌Thermobifida fusca的Ⅰ型葡萄糖异构酶(TFGIase)的N端,构建了融合蛋白N-TFGIase.实验结果显示:在相同培养和诱导条件下,N-TFGIase,菌体单位浓度产酶量比TFGIase 高出约40％,比酶活比TFGIaSe高出26％,最适温度比TFGIase高出5℃,75℃下的半衰期较TFGIase延长30％,最适pH较TFGIase降低1.0.序列分析表明:TTGIaseN端序列的mRNA二级结构不形成有阻碍的颈环结构,提高了融合蛋白的表达效率;其含有的31个氨基酸残基的疏水性指数均小于0,利于融合蛋白的初始折叠和包装;其含有的酸性氨基酸残基比例约为碱性氨基酸残基比例的两倍,减小了酸性介质环境对融合蛋白分子表面的影响.
关键词：融合蛋白超嗜热菌Ⅱ型木糖/葡萄糖异构酶N端序列催化性能序列分析
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2012AA021500)国家自然科学基金(81274021)国家自然科学基金(H2801)皖西学院科研基金项目(WXZR201616)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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