蜡样芽胞杆菌YSQ08碱性蛋白酶aprA基因在毕赤酵母中的表达
黄东彦1
Shanti Mazu1
朱辉1
朱剑锋2
胡文锋1
1.华南农业大学食品学院,广东广州,5106422.生物源生物技术(深圳)股份有限公司,广东深圳,518055
摘要：从蛇消化道内容物分离出的一株产角蛋白酶菌株为蜡样芽孢杆菌YSQ08.通过分析Bacillus cereus ATCC 14579的基因组和蛋白酶家族,对比分析蜡样芽孢杆菌YSQ08纯化角蛋白酶的酶活特性,确定碱生蛋白酶aprA基因(1194bp)为目标角蛋白酶.为深入研究角蛋白酶的潜在能力,对蜡样芽孢杆菌YSQ08碱性蛋白酶aprA基因在毕赤酵母X33上进行克隆、表达和优化重组.结果其10倍浓缩的角蛋白酶酶活达到122.60 U/mL.经优化后的aprA基因在表面展示重组酵母中得到高效表达,并且具有较高的角蛋白酶活性,酶活最高可达到295.78U/g干细胞重.酶学性质分析结果表明,表面展示表达的重组aprA蛋白酶生质与天然型相比具有更高的热稳定性,最适反应温度为55℃,最适pH为8.0.Fe2+可显著提高重组蛋白的酶活性,最高可达329.08％.表面展示表达的重组角蛋白酶可作为全细胞固定化催化剂,具有更好的热稳定性并能降低酶的纯化回收成本.
关键词：角蛋白酶aprA蜡样芽胞杆菌表面展示毕赤酵母
资助基金：深圳市战略新兴产业发展专项(CXZZ20140418101933991)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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