干酪乳杆菌LCR6013中NiR和电子供体的分离纯化及其协同降解亚硝酸盐
陈浩
陈思敏
刘冬梅
黄娟
陈舒然
吴晖
黄智斌
韩欣
1.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106402.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106403.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106404.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106405.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106406.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106407.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106408.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,510640
摘要：干酪乳杆菌LCR 6013经10.00 mg/L的亚硝酸钠诱导和溶菌酶破壁,粗酶溶液分别经过30％和60％饱和硫酸铵溶液分级沉淀,沉淀被溶解和透析后分别得蛋白液Ⅰ和蛋白液Ⅱ,通过阴离子DEAE Sepharose Fast Flow和葡聚糖凝胶G-100层析柱分离纯化.蛋白液Ⅱ纯化得亚硝酸盐还原酶蛋白(NiR),在加入细胞色素C才能降解亚硝酸盐,LCR6013的每升发酵液得到0.54 mg活性酶蛋白,其NiR比酶活为1851.20 U/mg,得率为2.08％,纯化后其NiR比活力提高16倍,经SDS-PAGE电泳确定LCR6013NiR的单体分子质量约为45 ku.同时,由蛋白液Ⅰ纯化的蛋白加入LCR6013的NiR中,表现降解亚硝酸盐的活力,经鉴定为电子供体蛋白(ElD),经SDS-PAGE电泳确定LCR6013中ElD的单体分子质量约为13ku,与细胞色素C的单体分子质量相同.LCR6013的ElD、细胞色素C、FeSO4和Na2SO3分别协同NiR能在48 h内将75.00 mg/L的亚硝酸钠完全降解,而LCR6013的ElD和细胞色素C降解效果最好.
关键词：干酪乳杆菌亚硝酸盐还原酶分离纯化电子供体
资助基金：国家自然科学基金(31101254)广东省自然科学基金(S2011010005679)中央高校基本科研业务费专项(D2116760)广东省省级科技计划(2014A020208019)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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