植物乳杆菌α-葡萄糖基转移酶基因挖掘及表达研究
谢露1
郭丽琼1
林俊芳1
叶志伟1
钟倩婷2
1.华南农业大学食品学院,食品生物技术研究所,广东广州510640;广东省微生态制剂工程技术研究中心,广东广州5106402.华南农业大学食品学院,食品生物技术研究所,广东广州510640
摘要：α·葡萄糖基转移酶(α-GTF)是一类可以利用麦芽糖,异麦芽糖,O-甲基葡萄糖苷等为底物合成低聚糖的多功能性酶,因其功能多样性和独特性而备受关注.本文利用本团队测序的植物乳杆菌(FMNP01)全基因组信息,采用生物信息学方法分析获得α-葡萄糖基转移酶基因(α-gtf),同时根据NCBI中上传的乳酸菌全基因组信息中的α-GTF的DNA序列设计引物,利用PCR技术分别从植物乳杆菌、干酪乳杆菌和短乳杆菌中克隆得到3个α-gtf基因,其编码的氨基酸序列相似性分别为42％、29％和29％;将克隆得到的3个基因分别与表达载体pET-32a连接构建成表达质粒,转入大肠杆菌BL21表达宿主菌中进行诱导表达,产物经SDS-PAGE分析表明,在75 ku处都有一明显条带,与预期蛋白分子量一致,表明这3个基因成功获得了表达.同时对诱导剂浓度、诱导时间和温度进行优化,可望为以后相关研究奠定了基础.
关键词：乳酸菌α-葡萄糖基转移酶基因挖掘原核表达
资助基金：国家自然科学基金(31272217,31372116)广东省科技计划(2015030313425,2015A030310225,2015A020209121)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 94-98 )
英文信息