人溶菌酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达
刘思彤
徐龙龙
衣泽浩
刘晓静
惠丰立
1.南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳,4730612.南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳,4730613.南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳,4730614.南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳,4730615.南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳,473061
摘要：人溶菌酶是一种天然广谱抑菌物质,在食品和医药工业有潜在应用前景.为获得高活性的人溶菌酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母表达系统,对经密码子优化的人溶菌酶基因(hLYZ)进行分泌表达.将人工合成hLYZ插入到乳酸克鲁维酵母表达载体pKLAC1,构建重组载体pKLACI-hLYZ,并用电脉冲法将Sac Ⅱ线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中.通过全细胞PCR鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌hLYZ1.工程菌可以分泌表达分子量约14ku的目的蛋白质,与预期大小相符.摇瓶发酵培养128 h,酶活最高达到1430 U/mL.抗菌活性检测结果显示,重组人溶菌酶对溶壁微球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有较好的溶菌活性.本研究成功地在乳酸克鲁维酵母中表达了重组人溶菌酶,表达的蛋白具有较高的酶活性,试验结果为利用乳酸克鲁维酵母表达系统规模化生产重组人溶菌酶奠了基础.
关键词：人溶菌酶乳酸克鲁维酵母分泌表达抗菌活性
资助基金：国家自然科学基金(31370073)河南省基础与前沿技术研究计划(102300410146)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 105-109,87 )
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