酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰产物的分离纯化及其抗氧化活性研究
戚莉佳1
庞佳楠1
马春敏1
陈芳芳1
李铁晶2
1.东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨,1500302.辽宁大学轻工学院,辽宁沈阳,110000
摘要:本文采用木瓜蛋白酶在pH 6.5的条件下对酪蛋白进行水解2h,水解产物测得DPPH 35.89%±0.13%,超氧阴离子清除能力为21.39%±0.33%,还原能力为53.00%±2.00%.分别导入Tyr、Phe和Try对水解产物进行修饰,结果表明类蛋白反应时间为6h时,三种产物的抗氧化性最高,其中Try修饰产物抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别46.84%± 1.16%、34.10%±0.32%、70.00%±2% (p<0.05).随后,将Try修饰下的产物进行分离纯化,使用装有G-15葡聚糖凝胶的色谱柱,水为洗脱液,上样浓度为20 mg/mL,流速为0.5 mL/min,洗脱效果最佳,得到三个峰,分别测定其抗氧化性,结果表明峰二的抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别为58.46%±0.57%、38.42%±0.47%和80.00%±0.02% (p<0.05).将峰二产物通过液相色谱进一步分离鉴定,得到单一峰,证明蛋白纯化下的产物纯度较高.最后,得到了高纯度的抗氧化肽.
关键词:抗氧化活性酪蛋白水解类蛋白反应分离纯化
资助基金:国家自然科学基金(31201337)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 91-96 )
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